Лабораторная работа: Правила работы в микробиологической лаборатории. Методы изучения морфологии микроорганизмов и строения клеток

В микроскопе имеются объективы, дающие увеличение в 3,2, 10 и 40 раз, предназначенные для работы с сухими системами, и объектив с черной полосой для иммерсионной системы, дающей увеличение в 100 раз.

При работе с иммерсионным объективом, после установки света, при малом увеличении выбирают участок на препарате, на выбранное место наносят каплю кедрового масла и осторожно погружают в нее фронтальную линзу объектива 100х. По окончании работы остатки масла с этой линзы удаляют, тщательно протирая ее мягкой тканью.

Осветительный аппарат находится под предметным столиком и включает (см. рис. 1):

- источник света в виде миньона. Данная лампочка вмонтирована внутри подставки, ее яркость можно регулировать при помощи реостата 10, расположенного на задней панели, там же расположен тумблер включения микроскопа в сеть;

- конденсор Аббе; апертуру конденсора можно регулировать, открывая и закрывая диафрагму конденсора при помощи рычажка 12. Конденсор Аббе состоит из двух линз, заключенных в металлическую оправу и предназначенных для собирания лучей света, идущих от зеркала;

- отражающее зеркало, которое можно увидеть в окошко 13. Количество лучей, попадающее на зеркало, можно регулировать при помощи диафрагмы светового поля. Рычажок диафрагмы обозначен позицией 14.

2.2 Установка света по Келеру

Наилучшие результаты при работе с микроскопом могут быть получены лишь при условии правильного освещения объекта. Лучший способ освещения основан на системе Келера. Последняя включает следующие основные приемы: а) получение резкого изображения источника света (спирали лампы на диафрагме конденсора; б) получение резкого изображения ирисовой диафрагмы осветителя в плоскости препарата.

Порядок установки света по Келеру:

1. Включить в сеть.

2. Включить тумблер лампы.

3. Поднять конденсор вверх до упора винтом конденсора 9.

4. Отвести лампу широких полей и нейтральный светофильтр.

5. Увеличить яркость лампы реостатом 10.

6. Закрыть апертурную диафрагму конденсора 12.

7. Открыть диафрагму светового поля до упора (установочный рычаг 14).

8. Проверить симметричность изображения светового пятна на нижней стороне апертурной диафрагмы конденсора (при правильной ориентации лампового патрона изображение светящегося пятна на нижней стороне апертурной диафрагмы в виде спирали и зеркальное изображение расположены параллельно друг другу, если такое условие не выполняется, нужно поднять микроскоп и поворотом кольца поправить ориентацию).

9. Поставить объектив 10х.

10. Уменьшить яркость лампы реостатом 10.

11. Установить препарат.

12. Открыть апертурную диафрагму конденсора на 2/3 (рычажок 12).

13. Сфокусировать микрообъект с помощью механизма наводки (макро-микровинт 7). Для этого расположить объектив на расстоянии 1 см от препарата и, глядя в окуляр, медленно опустить препаратный столик, находя изображение.

14. Закрыть полевую и апертурную диафрагму. В поле зрения видно нерезкое изображение краев диафрагмы светового поля.

15. Сфокусировать изображение светового поля с помощью конденсора.

16. Отцентрировать световое пятно с помощью центровочных винтов.

17. Открыть диафрагму светового поля, чтобы края светлого пятна чуть заходили на поле зрения (на 2/3 диаметра).

2.3 Изображения фиксированных препаратов

В результате исследования метода изучения морфологии и строения клеток методом микроскопии были исследованы 3 фиксированных препарата.

1. Эвглена Зелёная

2. Плесень Мукор

3. Бактериальная клетка