Реферат: Возбудитель псевдотуберкулеза
Bact. pseudotuberculosis murium – неподвижная, грамотрицательная палочка с острыми концами, хорошо растет на обычных питательных средах, не разжижает желатины, в бульоне образует муть, молоко не свертывает. Вызывает заболевание только у мышей.
4. Морфологические и тинкториальные свойства возбудителя
Yersiniapseudotuberculosis по морфологии практически неотличим от возбудителя чумы. Это полиморфная бактерия. Встречаются овоидные (кокковидные) формы длиной 0,8-2,0 мкм и шириной 0,4-0,8 мкм, а также палочки с закругленными концами длиной 1,5-6 мкм и шириной 0,4-0,8 мкм. Подвижна, имеет жгутики (5-9), спор не образует, иногда синтезирует капсулу. В мазках из жидких сред и в препаратах из органов погибших животных может располагаться одиночно или цепочками. Микроб окрашивается биполярно всеми анилиновыми красками, грамотрицателен.
Возбудителя псевдотуберкулеза овец по определителю Берги относят к роду Corynebacterium группы коринеформных бактерий, имеющих близкое родство с микобактериями и нокардиями.
5. Культуральные и биохимические свойства
Ерсинии псевдотуберкулеза – факультативный анаэроб, хорошо растет на обычных (МПА и МПБ) "голодных" питательных средах при рН 6,0-8,0 (оптимум 7,2-7,4) и температуре 28-30°С. При пониженных температурах (4-22°С) бактерия приобретает жгутиковый аппарат и становится подвижной, чем и отличается от возбудителя чумы. Может обитать и размножаться в холодных водоемах. На пластинках агара формирует круглые, выпуклые, прозрачные, серовато-желтые, маслянистые колонии с ровными краями, приподнятым мутноватым центром и плоской перефирией с радиальной исчерченностью (S-форма). Нередко дает шероховатые колонии, не отличающиеся от типичных колоний чумного микроба. S-форма более вирулентна. На скошенном агаре вырастает в виде массивного сплошного серовато-желтого прозрачного налета с блестящей волнистой поверхностью и извилистыми краями. В бульоне дает равномерное помутнение, со временем жидкость просветляется и выпадает вязкий осадок, иногда отмечают пристеночный рост.
Возбудитель псевдотуберкулеза овец на агаре растет в виде колоний с зазубренными краями и складчатой или зернистой поверхностью. Через 6-8 дней они достигают велечины чечевичного зерна. На свернутой сыворотке в течение суток формирует характерные золотисто-желтые или оранжевые колонии. На бульоне растет без заметного помутнения с образованием зернистого осадка и на поверхности - ломкой пленки.
Ферментирует до кислоты без газа глюкозу, галактозу, мальтозу, рамнозу, глицерин, маннит, не расщепляет лактозу, сахарозу, в первые сутки сбраживает мочевину, индол не образует, выделяет аммиак, иногда сероводород, восстанавливает нитраты в нитриты. Желатину не разжижает. Обладает гемолитическими свойствами (эритроциты лошади, кролика, морской свинки).
6. Патогенные свойства
Ерсиния псевдотуберкулеза обладает значительной экологической вирулентностью, то есть поражает большое число видов животных. В настоящее время спонтанная зараженность ерсиниями отмечена у 60 млекопитающих и 27 видов птиц. В естественных условиях восприимчивы зайцы, дикие кролики, ондатры, серые крысы, домовые мыши, песчанки, выхухоль, куницы, хорьки, куры, индейки, фазаны, голуби, канарейки др. Экспериментально удается заразить овец и свиней. Лошади, коровы, ослы, козы, собаки и кошки маловосприимчивы. Из лабораторных животных чувствительны белые мыши, кролики, морские свинки. Заражение их удается perosи перентерально. Морские свинки, кролики, мыши, зараженные внутривенно или внутрибрюшинно, обычно гибнут от псевдотуберкулеза спустя 1-2 недели, у экпериментально зараженных грызунов характерны узелки в печени, селезенке и в почках. У самцов морских свинок в результате внутрибрюшного заражения развивается орхит (скротальный феномен – сходство с сапом).
Ерсинии псевдотуберкулеза синтезируют экзотоксин и обладают активными эндотоксинами белковой природы (полисахаридно-липоидный комплекс). Некоторые штаммы ерсиний в бульонных культурах образуют сильный токсин.
7. Устойчивость к действию факторов внешней среды
При разрушении микробных клеток выделяется эндотоксин, у некоторых штаммов обнаружена способность к продукции экзотоксинов. Важным свойством возбудителя является способность расти на питательных средах при низких температурах. Так Yersinia pseudotuberculosis способна размножаться при температуре +4-+8оС. Она устойчива к повторному замораживанию, способна длительно существовать в почве, воде, на различных пищевых продуктах, а в условиях низкой температуры и повышенной влажности - размножаться и накапливаться. Возбудитель псевдотуберкулеза быстро погибает при высыхании, воздействии прямого солнечного света, высокой температуры, при кипячении погибает через 10-30 сек. Дезинфицирующие вещества (3% раствор хлорамина, 3-5% раствор карболовой кислоты и лизола, раствор сулемы 1:1000 и др.) убивают псевдотуберкулезный микроб в течение 1-2 ч.
8. Антигенная структура
Данный микроб имеет сложную антигенную структуру: в его состав входит 5 жгутиковых (H)- a, b, c, d, e и 12 соматических гладких (О)- 1-12 антигенов, кроме того, имеется один шероховатый антиген, общий для всех ерсиний. Гладкие антигены являются типовыми и соответственно им различают пять серологических типов, однако повсеместно преобладают бактерии первого типа. Шероховатый (R) антиген имеют все ерсинии, он общий и с возбудителем чумы.
9. Диагностика
Материалом для бактериологического исследования являются трупы грызунов, от погибших животных – лимфатические узлы, кусочки патологически измененных паренхиматозных органов. Схема исследования включает: бактериоскопию, выделение чистых культур и биологический метод.
Из исследуемого материала готовят мазки, которые окрашивают по Грамму и Романовскому - Гимзе. Посевы проводят на МПА, МПБ, а так же специальные обогащенные среды, дифференциальную среду Серова или агар Хоттингера с генцианвиолетом в концентрации 1: 200000. Заражают подкожно белых мышей или лучше морских свинок. Мыши гибнут на 3-7е сутки, свинки на 3-13е сутки.
При исследовании на псевдотуберкулез овец в лабораторию направляют трупы овец или измененные участки паренхиматозных органов и лимфатические узлы. Схема исследований аналогична описанной выше. Возбудитель псевдотуберкулеза овец легко дифференцируется от ерсиний псевдотуберкулеза: это неподвижный, грамположительный, не окрашивающийся биполярно и не ферментирующий глюкозу микроб.
Необходимо псевдотуберкулез дифференцировать от туберкулеза по следующим признакам: возбудитель некислотоустойчив (возбудитель туберкулеза кислотоустойчив), палочки легко растут на обычных питательных средах (возбудитель туберкулеза медленно), в мазках из очагов обнаруживают грамположительные палочки (при туберкулезе находят палочки, красящиеся по Циль-Нильсену), при посеве из очага легко удается выделить культуру возбудителя (при туберкулезе для выделения культуры заражают лабораторных животных), узелки быстро развиваются, размягчаются, появляется творожистое перерождение (при туберкулезе узелки твердые, сильно пролиферирующие и крупноклеточные), в очагах не бывает отложения извести (при туберкулезе очаги обызвествленные), очаг рано инкапсулируется, капсула утолщается и имеет гладкую внутреннюю поверхность (при туберкулезе очаг окружен фибринозной соединительной тканью).
Так же ерсинию псевдотуберкулеза необходимо отличить от возбудителя зооантропонозной чумы. При этом ориентируются по таким признакам: бактерия чумы неподвижна, лизируется чумным бактериофагом, не растет на среде Бессоновой (голодный агар), не разлагает мочевину, патогенна в R-форме, обладает пестиногенностью; ерсиния псевдотуберкулеза подвижна, лизируется псевдотуберкулезным фагом, растет на среде Бессоновой, разлагает мочевину с образованием щелочи, патогенна в S-форме, пестиногенностью не обладает.
В серологической диагностике используют реакции агглютинации (РА) и непрямой гемагглютинации (РНГА). Диагностическим титром может считаться для РА 1:200, для РНГА 1:100. Достоверным диагностическим критерием при использовании данных методов является четырехкратное нарастание титра специфических антител в динамике заболевания при исследовании парных сывороток. Использование серологических методов, основанных на обнаружении специфических антител к антигенам иерсиний, имеет ряд серьезных недостатков, основными из которых являются невысокая специфичность и поздние сроки подтверждения диагноза.
Использование в качестве диагностикума очищенной псевдотуберкулезной гипериммунной сыворотки позволило создать несколько экспресс-методов обнаружения антигенов иерсиний в организме больных: РНГА, РНИФ (реакция непрямой иммунофлуоресценции), РКА (реакция коагглютинации), латекс-агглютинация, ИФА (иммуноферментный анализ). Эти методы позволяют обнаружить антигены иерсиний в различных биологических средах организма в первые дни заболевания.
В настоящее время апробированы и в ближайшем будущем найдут широкое практическое применение для диагностики псевдотуберкулеза такие современные методы, как иммуноблотинг и полимеразная цепная реакция (ПЦР). Эти методы значительно увеличивают вероятность правильного лабораторного диагноза уже при первом обследовании больного. Так, для постановки диагноза при помощи ПЦР достаточно несколько молекул ДНК иерсиний в исследуемом материале.
10. Специфическая профилактика и терапия заболевания
Специфическая профилактика, несмотря на многочисленные исследования в области вакцинации, до настоящего времени не разработана. А терапия в ветеринарной медицине не предусмотрена.
Заключение
Несмотря на то, что псевдотуберкулез уже несколько десятилетий привлекает к себе внимание ученых, и многие вопросы патогенеза и иммунитета его хорошо изучены, заболеваемость этой инфекцией в Российской Федерации остается на достаточно высоком уровне. Эта болезнь имеет много клинических форм и нередко принимает хроническое течение, сопровождаясь развитием рецидивов и обострений. Причиной этого является способность возбудителя Y. рseudotuberculosis сохранять жизнеспособность в фагоцитах макроорганизма. Кроме этого, при этом ифекционном заболевании развивается вторичное иммунодефицитное состояние, требующее коррекции.
Профилактика иерсиниоза у животных предусматривает строгое соблюдение ветеринарно-санитарных и зоогигиенических правил ухода за животными, направленных на создание оптимальных условий содержания и кормления животных и предотвращение их заражения через объекты внешней среды. Существенное значение имеют дератизационные мероприятия на объектах питания, водоснабжения и животноводческих комплексах. Необходимо уничтожать грызунов и регулярно проводить тщательную дезинфекцию помещений. При подозрении на псевдотуберкулез не реже двух раз в месяц проводить клинический осмотр животных (птицы), подозрительных в заболевании животных изолируют и исследуют бактериологически, больных целесообразнее убить.