Некоторые клеточные линии требуют для роста особых стероидных гормонов (эстрадиола, тестостерона, прогестерона).

Сыворотка содержит также белки, функцией которых является связывание молекул с низким молекулярным весом. Альбумин связывает витамины, липиды (жирные кислоты, холестерин), стероидные гормоны и т.д. Железонасыщенный трансферрин необходим для большинства клеток в культуре, многие из которых обладают специфичными трансферриновыми рецепторами на поверхности.

Сыворотка является также источником различных липидов, необходимых для выживания и роста культивируемых клеток. Клеточные линии различаются по их потребности в жирных кислотах, фосфолипидах, лецитине и холестерине.

Роль различных неорганических элементов, содержащихся в сыворотке в следовых количествах (Cu, Zn, Co, Mn, Mo, Va, Se) выяснена не до конца, но известно, что многие из них действуют как кофакторы ферментов. SeO32 - требуется для активации ряда ферментов, участвующих в метаболической детоксикации. Селен участвует также в инактивации свободных радикалов.

Таблица 2.

Белковые фракции плазмы крови человека

Белковая фракция	Белковая фракция	Средняя концентрация	Мол. вес Х 1000	Изоэлек-трическая точка	Физиологическое значение
Электрофо- ретическая	Иммунофо-ретическая
Альбумин	Преальбумин	30	61	4,7	Частичное связывание тироксина, онкотическое давление, транспортная функция, белковый резерв
Альбумин	Альбумин	4000	69	4,9	Частичное связывание тироксина, онкотическое давление, транспортная функция, белковый резерв
альфа - глобулины	Кислый альфа1 - гликопротеин	80	44	2,7	Продукт распада тканей
- " -	альфа1 - Липо	350	200	5,1	Транспорт липидов (в частности, фосфолипидов)
альфа2-Глобу - лины	Церулоплазмин	30	160	4,4	Обладает оксидазной активностью
альфа2-Глобу - лины	альфа2 - Макроглобулин	250	820	5,4	Ингибирует плазмин и протеиназы
альфа2-Глобу - лины	альфа2 - Гаптоглобулин	100	85	4,1	Связывает гемоглобин и препятствует его выведению с мочой
бета-Глобу - лины	Трансферин	300	90	5,8	Транспорт железа
бета-Глобу - лины	бета-Липо - протеин	550	3000-20000	-	Транспорт липидов (в частности, холестерина)
Фибриноген	400	340	5,8	Свертывание крови
гамма-Глобу - лины	гамма-Глобу - лины	1200	156	5,8	Иммуноглобулины: антитела протиы бактериальных антигенов и инородных белков.
гамма-Глобу - лины	гаммаА-Глобу - лин	240	150	7,3
гамма-Глобу - лины	гаммаМ-Глобу - лин	125	960	"Естественные антитела" (напр., изогемагглютинины)
гамма-Глобу - лины	гаммаЕ-Глобу - лин	0,03	190	Антитела

Функции плазмы крови.

1. Питательная функция:

В организме человека содержится около 3 л плазмы, в которой растворено примерно 200 г белка. Это вполне достаточный запас питательных веществ. Обычно клетки захватывают не столько белки, сколько аминокислоты, однако некоторые клетки могут захватывать белки плазмы и расщеплять их при помощи собственных внутриклеточных ферментов. Высвобождающиеся при этом аминокислоты поступают в кровь, где сразу же могут использоваться другими клетками для синтеза новых белков.

2. Транспортная функция:

Многие небольшие молекулы при переносе их от кишечника или депо к месту потребления связываются со специфическими белками плазмы.

Все белки плазмы связывают катионы крови и переводят их в недифффундирующую форму. Так, около 2/3 кальция плазмы неспецифически связано с белками. Связанный кальций находится в равновесии со свободно растворенным в плазме ионизированным физиологически активным кальцием.

2.1 Форменные элементы крови - клетки

2.1.1 Гранулярные лейкоциты

Лейкоциты (leucocytus), или белые кровяные клетки, в свежей крови бесцветны, что отличает их от окрашенных эритроцитов. Число их составляет в среднем 4-9 109/л, т.е. в 1000 раз меньше, чем эритроцитов. Лейкоциты в кровяном русле и лимфе способны к активным движениям, могут переходить через стенку сосудов в соединительную ткань органов, где они выполняют основные защитные функции. По морфологическим признакам и биологической роли лейкоциты подразделяют на две группы: зернистые лейкоциты, или гранулоциты (granulocytus), и незернистые лейкоциты, или агранулоциты (agranulocytus).

К гранулоцитам относятся нейтрофильные, эозинофильные и базофильные лейкоциты. Они образуются в красном костном мозге, содержат специфическую зернистость в цитоплазме и сегментированные ядра.

У зернистых лейкоцитов при окраске крови по Романовскому - Гимзе смесью кислого (эозин) и основного (азур II) красителей в цитоплазме выявляются специфическая зернистость (эозинофильная, базофильная или нейтрофильная) и сегментированные ядра. В соответствии с окраской специфической зернистости различают нейтрофильные, эозинофильные и базофильные гранулоциты. Группа незернистых лейкоцитов (лимфоциты и моноциты) характеризуется отсутствием специфической зернистости и несегментированными ядрами. Процентное соотношение основных видов лейкоцитов называется лейкоцитарной формулой.

Общее число лейкоцитов и их процентное соотношение у человека могут изменяться в норме в зависимости от употребляемой пищи, физического и умственного напряжения, при различных заболеваниях. Поэтому исследование показателей крови является необходимым для установления диагноза и назначения лечения. Концентрация лейкоцитов в крови у взрослого в норме составляет 4000-8000 клеток/мкл (по некоторым данным верхняя граница нормы достигает 10000). Концентрация лейкоцитов у детей в норме меняется в зависимости от возраста: у новорожденных она равняется 10000-30000 клеток/мкл, на 4 день снижается до 12000, к 4-м годам составляет 8000 клеток/мкл. Уровня, характерного для взрослого, этот показатель достигает примерно к 12-14 годам. С возрастом происходят изменения не только количества, но и качественного состава лейкоцитов.

Все лейкоциты способны к активному перемещению путем образования псевдоподий, при этом у них изменяются форма тела и ядра. Они способны проходить между клетками эндотелия сосудов и клетками эпителия, через базальные мембраны и перемещаться по основному веществу (матриксу) соединительной ткани. Скорость движения лейкоцитов зависит от следующих условий: температуры, химического состава, рН, консистенции среды и др. Направление движения лейкоцитов определяется хемотаксисом под влиянием химических раздражителей - продуктов распада тканей, бактерий и др. Лейкоциты выполняют защитные функции, обеспечивая фагоцитоз микробов (гранулоциты, макрофаги), инородных веществ, продуктов распада клеток (моноциты - макрофаги), участвуя в иммунных реакциях (лимфоциты, макрофаги).

Нейтрофилы (нейтрофильные лейкоциты, или нейтрофилы) - самая многочисленная группа лейкоцитов, составляющая 2,0-5,5 109/л крови D8-78 % от общего числа лейкоцитов (рис.3). Их диаметр в мазке крови 10-12 мкм, а в капле свежей крови 7-9 мкм. В зрелом сегментоядерном нейтрофиле ядро содержит 3-5 сегментов, соединенных тонкими перемычками. В ядре гетерохроматин занимает широкую зону по периферии ядра, а эухроматин расположен в центре. Для женщин характерно наличие в ряде нейтрофилов полового хроматина (Х-хромосома) в виде барабанной палочки - тельца Барра. В популяции нейтрофилов крови могут находиться клетки различной степени зрелости - юные, палочкоядерные и сегментоядерные. Первые два вида - молодые клетки. Юные клетки в норме не превышают 0,5 % или отсутствуют, они характеризуются бобовидным ядром. Палочкоядерные составляют 1-6%, имеют несегментированное ядро в форме буквы S, изогнутой палочки или подковы. Увеличение в крови количества юных и палочкоядерных форм нейтрофилов свидетельствует о наличии кровопотери или воспалительного процесса в организме, сопровождаемых усилением гемопоэза в костном мозге и выходом молодых форм.

Рис.3. Нейтроф