Курсовая работа: Анализ биологических тканей и жидкостей

В индуктивно-связанной плазме ионы генерируются при атмосферном давлении, в то время как масс-спектрометр работает при давлении меньше чем 10^-5 мБар. Между ИСП и МС используется интерфейс в виде «узкого горла», с помощью которого вытягиваются ионы из плазмы и осуществляется перепад давлений.

Этот метод позволяет определить элементный состав биоматериала.

Преимуществами этого метода являются:

· Многоэлементность

· Низкие пределы обнаружения

· Малое время анализа

· Малый объем анализируемой пробы

Недостатком является то, что спектральные и матричные влияния существенно повышают нижнюю границу определения содержания.

Метод используется для выявления нарушений микроэлементного статуса пациента путем анализа крови, мочи или волос и позволяет разработать дополнительные пути коррекции различных патологий, а также прогнозировать и предотвращать ряд осложнений.

2. Газовая хроматография-сжигание-масс-спектрометрия

Позволяет определить соотношение изотопов 13С\12С. Метод широко используется в спортивном допинг-контроле. Соотношение этих изотопов в организме человека лежит в пределах от -17‰ до -27‰. При употреблении допинг-препаратов, которые изготавливаются обычно из растительного сырья, соотношение меняется до -30‰.

Перед определением изотопного соотношения хроматографичеки отделяют гормоны и вещества, аналогичные гормонам. Затем проводят определение соотношения изотопов.

Основная проблема этого анализа – сложность матрицы и существенная разница концентраций целевых соединений.

Так как пробоподготовка в масс-спектрометрических методах сложная и многоэтапная, каждая проба сопровождается двумя контрольными: заведомо положительной и заведомо отрицательной.

Иммунохимические методы

В основе иммунохимических методов анализа лежит высокоспецифичная и высокочувствительная иммунная реакция антигена с антителами. Антитела – это белки класса иммуноглобулинов, которые вырабатываются в иммунной системе в результате проявления защитной функции (иммунитета) при попадании в организм чужеродного вещества – антигена.

Антиген – это вещество, которое индуцирует выработку антител.

Достоинства метода:

· Быстрота и простота определения;

· Возможность автоматизации и использования для массовых анализов в полевых условиях;

· Не сложная пробоподготовка;

· Высокая точность;

· Не требуется дорогостоящей аппаратуры.

Недостатками можно назвать узкую специфичность и влияние компонентов матрицы.

Метод применяется для обнаружения вирусов, гормонов, лекарственных препаратов, определения биологически активных веществ.

Для определения моновалентных антигенов используется конкурентная схема – в систему водятся меченые ферментом вещества, которые конкурируют с антигеном при взаимодействии с ограниченным числом центров связывания специфичных антител.

Существует два способа реализации иммунохимического анализа – прямой и непрямой.

Прямой способ. Антитела нанесены на твердую фазу, ферментная метка вводится в антиген. Преимущества – небольшое число стадий и, соответственно, возможность автоматизации определения. Недостатки – сложность и неуниверсальность методов синтеза ферментных коньюгатов (промежуточная стадия иммунной реакции), а также возможное влияние компонентов образца на активность фермента

Непрямой способ. Антиген наносится на твердую фазу, ферментной меткой отмечаются вторичные антитела, полученные против иммуноглобулинов соответствующего типа. Достоиством этого способа является возможность устранения влияний различных эффектов на каталитические свойства ферментов.