Курсовая работа: Сальмонеллез телят в СХПК им. Короткова Вурнарского района Чувашской республики за 2007 год
W
X
Y
Z
52
53
Чтобы определить серотиповую принадлежность, сальмонеллы, отнесенные к определенной серогруппе, исследуют с Н – моносыворотками 1 – й и 2 – фазы. При выборе сывороток для реакции исходят из антигенной структуры сальмонелл той группы, к которой отнесена определяемая культура, с учетом вида животного.
Культуры сальмонелл, которые не удалось идентифицировать сыворотками из набора, следует направлять в Государственный институт контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов.
Техника постановки РА : из флакона, не захватывая осадка борной кислоты, пастеровской пипеткой набирают сыворотку, одну каплю которой наносят на предметное стекло. Бактериологической петлей в нее вносят 20...24-часовую исследуемую агаровую культуру сальмонелл. Для РА с О – сыворотками культуру берут с верхней части агара, с Н – сыворотками – с нижней, вблизи конденсационной жидкости. Петлю с культурой увлажняют в капле сыворотки, затем культуру тщательно растирают рядом с каплей, смешивают с сывороткой и энергично (6 – 10 раз) покачивают стекло круговыми движениями. Агглютинация наступает не позднее 1 – 2 мин. О – агглютинат выглядит как плотные, с трудом разбивающиеся комочки и зернышки; Н – агглютинат – крупные, рыхлые, легко разбивающиеся хлопья. Агглютинация проявляется в виде склеивания бактериальной массы и полного или частичного просветления жидкости. При отрицательной реакции культура после тщательного смешивания с каплей сыворотки образует гомогенную взвесь.
Агглютинирующие адсорбированные О – и Н – сыворотки выпускают согласно серологической классификации бактерий рода сальмонелл наборами и отдельными рецепторами. Кроме моно-рецепторных О – и Н – сывороток производят поливалентную сальмонеллезную О – сыворотку против сальмонелл основных пяти групп (А, В, С, D, Е). Наборы О – и Н – сывороток выпускают двух видов. Узкий набор состоит из 28 рецепторов. Расширенный набор включает в себя 108 рецепторов.
Монорецепторные О – и Н – сыворотки применяют для идентификации бактерий рода Salmonella в реакции агглютинации на предметном стекле, поливалентную – для отбора культур из первичных посевов.
Поливалентная сыворотка против сальмонелл основных групп содержит О – агглютинины против антигенов 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 15, 19, 26nvi.
При агглютинации культуры с О – сывороткой определяют ее групповую принадлежность. Затем при помощи Н – сывороток соответствующей группы окончательно устанавливают тип исследуемой культуры.
Сухие сыворотки перед употреблением растворяют в стерильном физиологическом растворе из расчета 2 мл на ампулу, что соответствует первоначальному объему сыворотки до высушивания. Растворенные сыворотки используют в реакции агглютинации на стекле. Методика постановки РА на стекле такая же, как и с комплексными сыворотками.
Биопроба . Метод применяют в необходимых случаях, например при выделении нетипируемых серологически сальмонелл. Исследуемую культуру вводят подкожно белым мышам по 0,2...0,3 мл при концентрации клеток
(0,5 – 1) • 108 /мл. В положительных случаях животные гибнут в течение 3 – 10сут.
Серологическая диагностика входит в состав лабораторной и заключается в постановке РА. Используют свежие сыворотки от животных или сыворотки, консервированные фенолом (до 0,5%), со сроком их давности не свыше 15 дней. Антиген для реакции агглютинации выбирают в зависимости от вида животного, а именно: сыворотки от крупного рогатого скота исследуют с антигенами S . enteritidis ( dublin ) и S . typhimurium , от свиней — S . typhisuis или S . choleraesuis и S . typhimurium и т. д.
Для постановки реакции агглютинации готовят двукратное разведение исследуемых сывороток карболизированным (0,5%-м) физиологическим раствором, начиная с разведения 1:25 и до 1:3200. Сыворотку берут по 0,5 мл каждого разведения.
При массовых исследованиях допускают постановку реакции в четырех разведениях (1:50, 1:100, 1:200, 1:400) с последующей проверкой положительных проб в разведениях сыворотки до 1:3200.
Одновременно ставят контроли:
1) с негативной сывороткой в тех же разведениях, что и исследуемые сыворотки;
2) с положительными сыворотками до их предельного титра;
3) антиген с физиологическим раствором без сыворотки.
В пробирки вносят по 0,5 мл соответствующего разведения сыворотки. Затем во все пробирки (в том числе и контрольные) добавляют по 0,5 мл антигена при концентрации клеток 5 • 108 мл. Штатив с пробирками тщательно встряхивают до получения равномерной суспензии и выдерживают в термостате при 37 – 38 °С 4 – 10 ч, затем оставляют при комнатной температуре на 14 – 20 ч, после чего проводят макроскопический учет реакции.
Реакцию считают положительной при наличии агглютинации в разведениях сыворотки 1:200 и выше, при отрицательных результатах реакции агглютинации — в контрольных пробирках. Реакцию считают сомнительной при наличии агглютинации в разведении сыворотки 1:100 и ниже. При получении сомнительной реакции сыворотку крови от этих животных исследуют повторно через 10... 15 дней, и в случаях, если титр не повысился, реакцию следует считать отрицательной. Оценивают реакцию агглютинации в крестах.
Возбудитель сальмонеллеза телят — S . enteritidis ( dublin ) может обусловливать гастроэнтерит у человека вследствие пищевой токсикоинфекции. По антигенной структуре относится к группе D1. Патогенен для белых мышей. Реже сальмонеллез телят может быть обусловлен S . typhimurium , который вызывает сальмонеллез у водоплавающей птицы и у человека. По антигенной структуре входит в группу В.
Лечение. Больных или подозреваемых в заболевании животных изолируют от общего поголовья. Проводят комплексное лечение направленное на повышение защитных сил организма (используют иммуностимуляторы и иммуномодуляторы). Применяют поливалентную антитоксическую сыворотку против сальмонеллеза. Для подавления сальмонелл используют бактериофаги, антибиотики, сульфаниламиды и нитрофурановые вещества (специфическая этиотропная терапия). Необходимо вводить витаминные препараты и бактериальные препараты АБК, ПАБК, ацидофилин.
Иммунитет. Животные преобретают иммунитет после перенесенного заболевания или при иммунизации.
Профилактика и меры борьбы. Профилактика инфекционных болезней — система мероприятий, обеспечивающих предупреждение возникновения и распространения болезней в благополучных хозяйствах.