Реферат: Аденилатциклазный сигнальный механизм
+ инсулин
10-7 М
17.13±0.98
(122%)
4.93±0.45
(126%)
7.51±0.33
(374%)
22.21±1.37
(261%)
+ инсулин
10-6 М
17.90±1.12
(128%)
5.12±0.21
(131%)
1.95±0.22
(97%)
24.39±1.62
(286%)
Изучение АЦ стимулирующего эффекта пептидов инсулинового суперсемейства и ЭФР в онтогенезе позволило выявить следующие факты. Наиболее выраженный АЦ активирующий эффект инсулина (10-11 М-10-6 М обнаруживается у куриных эмбрионов (10, 13, 16 суток) и цыплят (3 суток) при концентрации гормона 10-9 М, и составляет у 10-суточных эмбрионов +244%, у 13-суточных +308%, у 16-суточных +409% (Таблица 3), а у 3-х суточных цыплят (+186%) при более высокой концентрации 10-6 М, что может быть связано с переходом эмбрионов в постэмбриональный период, когда процессы роста и дифференцировки заканчиваются.
Проведенные нами исследования действия инсулина и ИФР-1 на активность АЦ в мембранной фракции, выделенной из культуры клеток куриных миобластов (4-й день развития) показали, что наибольший АЦ стимулирующий эффект инсулина (+352%) выявляется при концентрации 10-9 М, а ИФР-1 (+289%) при концентрации 10-10 М (данные в диссертации).
В мембранной фракции мышц моллюска АЦ стимулирующий эффект инсулина, ИФР-1, ИПП и ЭФР выявляется при концентрациях - 10-11 -10-8 М (Рис. 9). Инсулин и ИФР-1 оказывают наиболее выраженное стимулирующее действие на активность АЦ при концентрации 10-8 М (+63% и +54%, соответственно), а ИПП и ЭФР при 10-9 М (+415% и +223%, соответственно).
Таким образом, определен диапазон концентраций, при которых проявляется АЦ активирующий эффект исследуемых пептидов. Следует отметить видоспецифичность действия пептидов. Действие ИПП, выделенного из висцеральных ганглиев моллюска A . cygnea , является более эффективным в ткани моллюска и менее эффективным в тканях позвоночных.
Рис. 9. Базальная активность АЦ принята за 100%. Время действия пептидов – 2.5 мин.
Участие ц-АМФ-зависимой ФДЭ в механизме действия пептидов инсулинового суперсемейства
Уровень цАМФ в клетке зависит не только от АЦ – фермента, осуществляющего его синтез, но и от фосфодиэстеразы (ФДЭ) - фермента, обеспечивающего его деградацию. Исследована динамика во времени активности примембранной формы цАМФ-ФДЭ во фракции скелетных мышц кур. Эта изоформа ФДЭ локализована на внутренней стороне мембраны и способна активироваться инсулином (Houslay, 1985). Нами показано, что активность примембранной цАМФ-ФДЭ не изменяется через 2.5 и 5.0 мин после действия инсулина, увеличивается на +115% через 10 мин и на +179% через 20 мин, по сравнению с базальной активностью фермента, принятой за 100% (Таблица 4).
Таблица 4.Влияниеинсулина (10-8 М) на активность примембранной цАМФ-ФДЭ в скелетных мышц кур в зависимости от времени
| Воздействия | Активность цАМФ-ФДЭ (нмоль АМФ/мин/мг белка) | |||
| 2.5 мин | 5.0 мин | 10.0 мин | 20.0 мин | |
| Без инсулина |
К-во Просмотров: 332
Бесплатно скачать Реферат: Аденилатциклазный сигнальный механизм
| |||