Биологическая роль, структура и выделение митохондрий из печени крыс.

Содержание

1. Введение

1.1. История вопроса

1.2. Перспективы исследований

2. Биологическая роль митохондрий

3. Ультраструктура митохондрий

3.1. Общие принципы организации

3.2. Особенности строения мембраны митохондрий

4. Описание общих принципов различных методов выделения митохондрий

4.1. Гомогенизация материала

4.1.1. Механическая

4.1.2. На основе кавитации газов

4.1.3. Ультразвук

4.2. Разделение субклеточных компонентов

4.2.1. Центрифугирование

4.2.2. Разделение в двухфазной системе, содержащей два полимера

4.2.3. Электрофорез

4.2.4. Ферменты - маркеры митохондрий

5. Методики

6. Заключение

7. Список литературы

Введение

История вопроса.

Кёлликер одним из первых описал характерным образом ориентированные гранулы в саркоплазме поперечно-полосатой мышцы. Ему принадлежит так же честь первого выделения митохондрий из клеточных структур. В 1888 году он выделил эти гранулы из мышцы насекомых и показал, что они обладают мембраной и набухают в воде. Началом новой эры в цитологическом изучении митохондрий явилась работа Бенсли и Хэрра, которые предприняли попытку выделить митохондрий из взвеси разрушенных клеток печени, применив метод дифференциального центрифугирования. Из-за отсутствия подходящей среды для суспендирования и несовершенства метода центрифугирования Бенсли не удалось получить интактные митохондрий, но именно новаторская работа Бенсли определила слияние цитологических исследований митохондрий с исследованиями дыхания.

Перспективы исследований.

В настоящее время основная задача изучения митохондрий на молекулярном уровне сводится к выделению ферментативных компонентов окислительных циклов, определения их молекулярной структуры и механизма действия, анализу их участия в полиферментных системах в митохондриях и картированию их локализации на структурах митохондрий. То обстоятельство, что ферменты дыхательной цепи составляют более 25 % белка митохондриальных мембран заставляют рассматривать эти ферменты не только как функциональные, но и как структурные элементы митохондрии.

Биологическая роль митохондрий.

На протяжении ста с лишним лет, т. е. со времени первых работ Кёлликера (1850), наблюдавшего гра­нулы в саркоплазме поперечнополосатых мышц, велись кропотливые морфологические исследования, которые постепенно подготавливали почву для всестороннего изучения природы митохондрий. Но только в 1949 г. Кеннеди и Ленинджер установили, что в митохондриях протекает цикл окислительного фосфорилирования, т.е. что митохондрий служат местом генерирования энергии. С этого момента начинается новая эра в изучении мито­хондрий — эра, в которой блистательные открытия сле­дуют одно за другим. В короткий срок были открыты осмотическая, сократительная, регуляторная и генети­ческая функции митохондрий и найдены многие из тех молекулярных структур, которые служат первичным субстратом 'этих функций. Было показано также, что митохондрий обеспечивают интеграцию многочисленных процессов клеточного обмена. Эти исследования еще не, завершены, но они могут служить примером плодотвор­ности нового подхода к изучению живого, того подхода, который отличает молекулярную биологию.

--> ЧИТАТЬ ПОЛНОСТЬЮ <--