Реферат: Клонирование и анализ генов легких цепей иммуноглобулинов стерляди
КОНСТРУИРОВАНИЕ БИБЛИОТЕКИ кДНК И ЕЕ СКРИНИНГ.....................................38
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПЕРВИЧНОЙ СТРУКТУРЫ......................................................................40
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ПЕРВИЧНОЙ СТРУКТУРЫ..............................................40
АНАЛИЗ ГЕНОМНОЙ ОРГАНИЗАЦИИ..............................................................................41
ОБСУЖДЕНИЕ....................................................................................................................46
ВЫВОДЫ...............................................................................................................................48
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ................................................................................................49
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ИГ иммуноглобулины
пн пар нуклеотидов
тпн тысяч пар нуклеотидов
е.а. единица активности
ИПТГ изопропилтиогалактозид
ТЕМЕД N,N,N,'N'-тетраметил-этилен-диамин
трис трис(гидроксиметил)аминометан
дНTФ дезоксиаденозинтрифосфат
ддНТФ дидезоксинеклеотидтрифосфат
дНТФ дезоксинуклеотидтрифосфат
рATФ рибоаденозинтрифосфат
ДТТ дитиотрейтол
Na2ЭДТА этилендиаминтетраацетат натрия
SDS додецилсульфат натрия
X-Gal 5-бромо-4-хлоро-3-индолил-бета-D-галактозид
ВВЕДЕНИЕ
В основе функционирования гуморального иммунитета у млекопитающих лежит сложный комплекс молекулярно-генетических и физиологических механизмов, обеспечивающих реорганизацию, мутагенез и клональную экспрессию генов иммуноглобулинов. Возникновение этой подсистемы иммунитета связывают с появлением хрящевых рыб.
На ранних этапах эволюции гены ИГ были организованы в виде повторяющихся кластеров V-J-C генных сегментов. При подобной организации разнообразие продуцируемых антител основывалось, прежде всего, на количестве имевшихся в геноме кластеров, каждый из которых кодировал один вариант полипептидных субъединиц ИГ. В ходе дальнейшей эволюции произошел переход от кластерной к сегментарной организации, обеспечивающей дополнительный источник разнообразия за счет комбинативной рекомбинации генных сегментов. Предполагается, что этот переход также имел важное значение для регуляции экспрессии генов и осуществления механизмов клонального отбора антителопродуцирующих клеток в ходе иммунного ответа.
Настоящая работа представляет собой часть проекта, направленного на изучение эволюции механизмов изотипического исключения генов легких цепей ИГ у низших позвоночных. Целями работы являлись изучение структуры и организации генов легких цепей ИГ стерляди (Acipenser ruthenus), представителя филогенетически древней группы костно-хрящевых рыб.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
СТРОЕНИЕ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ