Реферат: Исследование отделяемого женских половых органов

В качестве фиксатора используют 96° этиловый спирт, смесь Никифорова, состоящей из равных частей 96° этилового спирта и эфира, раствор Лейшмана (состоящим из 1 л. метанола и 2, 5 г. краски Лейшмана), а также фиксируют над пламенем горелки.

Окраска мазков. Существуют мономорфные и полиморфные методы окраски мазков.

При полиморфных методах окраски клетки, в зависимости от их типа и физико-химических свойств цитоплазмы, окрашиваются дифференцированно в красно - оранжевый или сине - зелёный цвета.

Мономорфные методы.

Окраска гематоксилин - эозином. Мазок подсушивают на воздухе, фиксируют в смеси Никифорова или в 96° этиловом спирте в течение 7 - 10 мин. Затем окрашивают водным раствором гематоксилина (гематоксилин - 1, 0 г., калийные квасцы - 50, 0 г., йодид натрия - 0, 2 г., дистиллированная вода - 1000 мл. Раствор выдерживают на свету 14 дней, после чего он готов к употреблению). В течение 7 - 10 мин до получения слабо - фиолетового окрашивания. Далее мазок промывают проточной водой и окрашивают 0, 3% спиртовым раствором желтоватого эозина или 1% водным раствором эозина в течение 1 минуты. Затем снова промывают проточной водой и высушивают.

Окраска метиленовым синим. На подсушенный препарат наносят 1 - 2 кап.1% водного раствора метиленового синего и накрывают его покровным стеклом. Через 1 - 2 мин препарат промывают дистиллированной водой до обесцвечивания, которое производится следующим образом: на один край мазка наносят 1 - 2 капли дистиллированной воды, а к другому подносят фильтровальную бумагу. Затем высушивают и микроскопируют.

Окраска фуксином. На подсушенный препарат наносят на 1 мин. Раствор фуксина (3 г. фуксина растворяют в 1 л.96° спирта и к 12 мл. этого раствора добавляют 100 мл дистиллированной воды). Затем промывают водой, просушивают и микроскопируют.

Методика окраски по Лейшману. Высушенные на воздухе препараты заливают краской Лейшмана на 3 мин., при этом препарат одновременно фиксируется. После этого промывают водопроводной водой и заливают азур - эозиновой смесью (40 мл.0, 1% азура II и 30 мл.0, 1% эозина К) на 15 - 20 мин. Затем промывают водопроводной водой, высушивают на воздухе и микроскопируют.

Методика окраски по Романовскому. Фиксированные 96° спиртом или смесью Никифорова мазки заливают рабочим раствором краски Романовского - Гимзы на 20 - 25 мин. Затем промывают проточной водой и высушивают.

Полихромные методы.

Окраска по Папаниколау. Мазки фиксируют в смеси Никифорова 25 мин., после чего проводят их через серию спиртов, понижающей концентрации: 96°, 80°, 70° и дистиллированную воду (в каждом растворе мазки следует прополоскать). Далее мазки окрашивают гематоксилином Гарриса или Боммера в течение 50 мин. Промывают в 2 сосудах с дистиллированной водой 1 - 2 секунды и дифференцируют в 3% растворе едкого аммония (1 мин). После дифференцирования мазки проводят через спирт, повышающей концентрации: 70° (дважды), 80°, 95°. Окрашивают раствором с красителем оранж G (1 мин) и проводят через 2 сосуда с 70° спиртом. Затем мазки окрашивают полихромным красителем 1, 5 минуты и проводят через 95° спирт в 3 сосудах, затем через смесь равных частей абсолютного спирта и ксилола. Через ксилол (1 мин) и помещают в канадский бальзам.

Окраска по Докумову. Влажные мазки фиксируют в течение 30 мин смесью Никифорова, после чего, не подсушивая, наливают на них гематоксилин на 2 - 3 мин, после чего сливают и промывают мазки проточной водой. Далее мазки окрашивают полихромным красителем в течение 1 - 2 минут, затем его сливают, промывают препараты 70° и 95° спиртом, высушивают и помещают в канадский бальзам.

Во время всех этапов окраски мазки не должны высыхать.

Полихромный краситель: эритрозин - 0,25 г, лихтгрюн - 0,2; фосфорно-вольфрамовая и фосфорно-молибденовая кислоты по 0,2; оранж G - 0,1 г; ледяная уксусная кислота - 1 г; этиловый спирт - 50° - 100 мл.

Раствор красителя выдерживают в течение нескольких дней для созревания.

Морфологические особенности эпителия влагалища.

В состав эпителиальных клеток отделяемого влагалища в норме, подобно гистологической структуре покровного многослойного плоского эпителия влагалища и влагалищной части шейки матки отражает состояние функции яичников.

При пролиферативной фазе многослойный плоский эпителий достигает толщины 300 - 400 мкм, имеет хорошо выраженные признаки вертикальной анизоморфности, и состоит из трёх слоёв: базального, промежуточного и поверхностного.

При секреторной фазе менструального цикла многослойный плоский эпителий имеет толщину до 200 мкм. Часть клеток функционального слоя над сосочками слущена. Гликоген обнаруживается в виде незначительных скоплений в отдельных клетках промежуточного и функционального слоёв. В подэпителиальном сосочковом слое соединительной ткани видны скопления лимфоидных клеток и гистиоцитов.

При десквамативной и регенеративной фазах наблюдается слущивание большей части клеток функционального и промежуточного слоёв. Сохраняющийся на поверхности слизистой оболочки многослойный пласт нащитывает всего 4 - 12 слоёв и толщину до 42 - 96 мкм.

У женщин, находящихся в климактерическом периоде и менопаузе, многослойный плоский эпителий подвергается атрофии.

Рассмотрим структуру клеток многослойного плоского эпителия.

Клетки поверхностного эпителия крупные (диаметром от 40 до 50 мкм), в основном полигональные, реже - округлые или овальные с чёткими границами. Ядра клеток центрально расположеные, мелкие, интенсивно окрашенные, пикнотичные, диаметром не более 6 мкм. Цитоплазма светло - голубая при окраске по Лейшману, Романовского-Гимза и обнаруживаются мелкие вакуоли.

Большое количество клеток эпителия с пикнотичными ядрами свидетельствует о высокой эстрогенной активности. Наиболее богаты мазки клетками поверхностного эпителия в поздней фолликулиновой фазе.

Клетки промежуточного слоя многослойного плоского эпителия в норме составляет не более 10%. Форма их полигональная или овальная. Диаметр клеток 25 - 30 мкм. Цитоплазма окрашена базофильно. Ядерно-цитоплазматическое соотношение увеличено. Форма ядер пузырьковидная, округлая или овальная. Хроматин нежно - сетчатый или нежно - зернистый. Клетки располагаются разрозненно и в виде пластов разной величины.

Так как под влиянием палочек Додерлейна возможен цитолиз клеток, то в мазках обнаруживаются голые ядра.

Клетки нижних рядов промежуточного слоя относятся к парабазальным и составляют не более 5% всех клеток эпителия. Они разного размера (от 12 до 30 мкм), округлой, овальной или полигональной формы. Ядра их по величине аналогичны ядрам клеток промежуточного слоя. Цитоплазма окрашена базофильно, содержит вакуоли.

Особую группу клеток промежуточного слоя эпителия составляют так называемые ладьевидные клетки. Встречаются при беременности. Форма их вытянутая, ядра располагаются эксцентрично, цитоплазма богата гликогеном и под влиянием бактерий подвергается цитолизу.

Преобладание клеток промежуточного слоя наблюдается в начале фолликулиновой и во время лютеиновой фаз, послеродовом периоде, в менопаузе, и указывает на недостаточность эстрогенных гормонов.