Реферат: Исследование отделяемого женских половых органов
Окраска по Грамму требует особой тщательности, так как при недостаточном обесцвечивании гонококки могут сохранять окраску Грамма. При слишком длительном обесцвечивании окраску Грамма могут терять другие грамположительные кокки (стафилококки, стрептококки). Это может привести к ошибочным результатам.
Способ окраски по Грамму.
Реактивы.1 . Карболовый раствор генцианвиолета.
2. Раствор люголя.
3.96° спирт.
4. Водный раствор карболового фуксина.
Ход исследования.
На фиксированный препарат кладут полоску фильтровальной бумаги и наливают раствор генцианвиолета. Красят 1,5 - 2 минуты.
Бумажку сбрасывают и заливают препарат раствором Люголя на 2 мин.
Раствор Люголя сливают и прополаскивают препарат в спирте до сероватого цвета.
Промывают водой и окрашивают водным раствором карболового фуксина.
Промывают водой, высушивают препарат на воздухе и микроскопируют.
Исследовать содержимое влагалища взрослой женщины на гонококки нецелесообразно из - за обилия бактериальной флоры. Основная локализация гонореи - мочеиспускательный канал и канал шейки матки.
У маленьких девочек вследствие незрелости плоского эпителия, покрывающего влагалище, гонококковая инфекция проявляется в виде вульвовагинита.
При микроскопическом исследовании выделений в случае острой гонореи в препарате обнаруживаются расположенные преимущественно внутри нейтрофильных гранулоцитов, сгруппированные в шахматном порядке гонококки в случае хронической - приемущественно внеклеточно расположенные.
При хронической гонорее могут появляться дегенеративные формы гонококков. В первой стадии дегенерации наблюдаются слабоокрашенные микро - и макроформы гонококков; во второй - они теряют свою типичную почковидную форму и становятся полукруглыми; в третьей - они округляются в виде шарообразных диплококков; в четвёртой стадии - сжимаются в виде отдельных точек.
Для типичной гонореи в стадии обострения характерно наличие большого количества нейтрофильных гранулоцитов; гонококки расположены как внутри их, так и внеклеточно. Другой бактериальной флоры нет.
При латентно протекающей хронической гонорее много нейтрофильных гранулоцитов. Гонококки и другие микроорганизмы отсутствуют.
Наличие большого количества нейтрофильных гранулоцитов с полуразрушенными, дегенеративно изменёнными ядрами и цитоплазмой, палочек Дедерлейна и обилие банальной микрофлоры для гонореи нехарактерно, а после её лечения может служить признаком выздоровления.
Согласно приказу МЗ СССР № 936 от 12 июля 1985 г." Об унификации лабораторных методов исследования в диагностике гонореи и трихомониаза ", используются следующие методы выявления гонококков и влагалищных трихомонад в исследуемом материале.
Обнаружение гонококков и влагалищных трихомонад в исследуемом материале, окрашенном метиленовым синим.
Реактивы.1 .1% водный раствор метиленового синего;
2.96° этиловый спирт.
Оборудование : микроскоп с осветителем, песочные часы, штативы.
Приготовление препаратов . Материал наносят на чистые обезжиренные предметные стёкла тонким равномерным слоем, высушивают на воздухе.
Окраска. Препарат фиксируют 3 минуты в 96° этиловом спирте, высушивают и наносят на 1 мин 1% раствор метиленового синего, после чего тщательно смывают оставшийся краситель водой и высушивают в штативе.
Микроскопия . Исследование проводят с естественным или искусственным освещением (объектив 90 х иммерсионный, окуляр 7 х или 10 х; иммерсионное масло - кедровое).
Ядра клеток окрашены в синий цвет, протоплазма - в голубой различной интенсивности. Гонококки темно - синего цвета, резко очерчены, бобовидной формы, парные; располагаются внутриклеточно, в слизи и на эпителиоцитах.
Влагалищные трихомонады отличаются полиморфизмом (округлые, овальные, полигональные), расположены в слизи, между клеточными элементами; у них четко видна оболочка; ядро расположено эксцентрично и интенсивно окрашено в синий цвет, цитоплазма нежная, сетчатая, светло - синяя; вакуоли бесцветны.