Реферат: Методы исследования биологически активных соединений

Согласно этому закону, доля света, поглощенного в слое вещества, не зависит от интенсивности падающего излучения.

Зависимости, устанавливаемые этими законами, обычно выражаются одной формулой, которая связывает отношение интенсивностей падающего на образец (I0 ) и прошедшего через него (I) света с концентрацией (с) поглощающего вещества, содержащегося в образце толщиной (F 12):

log(I0 /I) = D = cc , (2)

где

- толщина образца,

D – оптическая плотность,

c - коэффициент экстинкции или показатель поглощения.

закон поглощения излучения может быть выведен без каких-либо предположений о природе этого излучения. Следовательно, этот закон применим к любому излучению независимо от длины волны.

Электронная абсорбционная спектроскопия (или спектроскопия в ультрафиолетовой и видимой областях спектра) относится к старейшим физическим методам, используемым химиками для качественного и количественного анализа. Это в полной мере относится и к исследованию биологически активных соединений несмотря на широкое применение и других методов, как химических, так и физических.

Рассмотрим закон поглощения света подробнее (рис. 8 и 9).

Отношение интенсивности прошедшего через образец света (I) к интенсивности подающего на него света (I0 ) называется пропусканием обозначается Т, и выражается обычно в %, т.е.

T = (I/I0 )´100 %.

Согласно закону поглощения, десятичный логарифм величины, обратной пропусканию, пропорционален концентрации анализируемого вещества. Эта величина называется оптической плотностью и обозначается заглавной латинской буквой D, т.е.

D = cсℓ,

где c - показатель поглощения или экстинкция раствора, концентрация которого равна единице, с – концентрация анализируемого вещества в образце и ℓ – толщина образца в сантиметрах, т.е. длина пути луча света в образце.

Величина c является специфической физической константой для каждого вещества и может быть использована для целей его идентификации. Знание этой величины позволяет определять содержание данного вещества в растворах неизвестной концентрации по измеренным значениям оптической плотности D.

Обычно используют два типа показателя поглощения c в зависимости от того, в каких единицах выражена концентрация анализируемого раствора.

Если концентрация выражена в молях на литр, то используется молярный коэффициент экстинкции e. Его размерность – л/моль см.

При проведении анализов лекарственных средств значительно чаще используется так называемый удельный показатель поглощения. В этом случае концентрация раствора выражается в г/100 мл раствора. Его обозначение Е1% 1см или А1% 1см . Следует помнить, что при стандартных измерениях толщина образца, т.е. толщина кюветы, всегда равна 1 см. Таким образом, молярный коэффициент экстинкции – это коэффициент экстинкции раствора с концентрацией 1 моль/л, а удельный показатель поглощения Е1% 1см – это показатель поглощения раствора с концентрацией 1 г/100 мл.

Если при измерении используется слой другой толщины, в расчеты необходимо ввести соответствующий коэффициент.

Таким образом, если концентрация раствора выражена в моль/л, то закон Ламберта-Бера имеет вид:

D = eсℓ.

Если же используется процентная концентрация (вес/объем), то

D = Е1% 1см сℓ.

Соотношения между показателями поглощения и примеры приведены в таблице (F 13).

Рис.1. Типичная хроматограмма

Рис. 3. сигнал с высоким уровнем шума (А) и его вид после оконной фильтрации (В). Показана форма использованного фильтра

???. 2. ???????? ?????? (???), ??? ? ??????? ????? (? ????????? ????????). ??? ????????????? ???? ????????? ??????/??? ????? ???????? 5.

Рис. 6. СХЕМА ЭНЕРГЕТИЧЕСКИХ ПЕРЕХОДОВ В МОЛЕКУЛЕ
Рис. 6. СХЕМА ЭНЕРГЕТИЧЕСКИХ ПЕРЕХОДОВ В МОЛЕКУЛЕ
Рис. 6. СХЕМА ЭНЕРГЕТИЧЕСКИХ ПЕРЕХОДОВ В МОЛЕКУЛЕ
Рис. 5. СПЕКТР ЭЛЕКТРОМАГНИТНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ

волновое число n - число волн на сантиметр = 1/l см-1 ;

частота колебаний n (с-1 ) – число полных колебаний в секунду.

v = Скорость света / Длина волны (см) = 3´1010 / l (см).

Все эти единицы связаны между собой:

(1)
1 ???????

Длина волны. Скорость света

Таблица 1

Единицы длины волны (l) и частоты (n )

ЕДИНИЦА

ОБОЗНАЧЕНИЕ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

ДЛИНА ВОЛНЫ

Микрометр (микрон)

Нанометр (миллимикрон)

К-во Просмотров: 262
Бесплатно скачать Реферат: Методы исследования биологически активных соединений