Реферат: Основные подходы к первичной обработке биологического сырья. Сепарация, осаждение, экстракция
Равновесное центрифугирование в градиенте плотности. Растворенное вещество и растворитель сначала распределяются по всему объему равномерно. В ходе центрифугирования устанавливается равновесное распределение концентрации, а следовательно, и плотности. Под действием центробежного ускорения молекулы вещества перераспределяются, собираясь в виде отдельной зоны в части пробирки с соответствующей им плотностью.
Для создания градиентов плотности применяются растворы сахарозы, тяжелая вода, соли тяжелых металлов, например рубидия или цезия.
Центрифуги.
Центрифуги общего назначения дают максимальную скорость 6000 об/мин и ОЦУ до 6000g. Во всех центрифугах этого типа роторы жестко крепятся на валу привода, и центрифужные пробирки вместе с их содержимым должны быть тщательно уравновешены с точностью до 0,25гр.
Скоростные центрифуги дают предельную скорость 25000 об/мин, ОЦУ до 89000g. Камера ротора снабжена системой охлаждения, предотвращающей нагревание.
Ультрацентрифуги дают предельную скорость до 75000 об/мин, ОЦУ до 510000g. Они снабжены как холодильником, так и вакуумной установкой. Роторы таких центрифуг изготавливают из высокопрочных титановых сплавов. Для уменьшения вибраций ультрацентрифуги имеют гибкий вал. Центрифужные пробирки и их содержимое должно быть уравновешено с точностью до 0,1гр.
4. Осаждение.
Глава методы осаждения вынесена для самостоятельной теоретической проработки, а также подробно рассматривается в рамках малого практикума.
5. Экстракция.
Мацерация – твердое вещество экстрагируют многократно отдельными порциями растворителя при комнатной температуре.
Дигерирование – твердое вещество экстрагируют отдельными порциями растворителя при нагревании. Измельченное твердое вещество размешивают с растворителем и затем фильтруют или декантируют.д.ля более полного извлечения операцию повторяют несколько раз, используя небольшие порции свежего растворителя.
Перколяция – непрерывная экстракция. Наибольшую эффективность процесса обеспечивает противоточный принцип. Он заключается в том, что материал, содержащий больше всего экстрагируемого вещества, омывается наиболее концентрированным раствором, а экстрагированный материал в верхних слоях омывается чистым растворителем.
Перфорация – непрерывная экстракция, если вещество хорошо растворимо в воде.
Распределение растворенного вещества между жидкими фазами определяется законом распределения Нернста. Трудность разделения определяется величиной b - фактором разделения. Оба вещества могут быть разделены удовлетворительно если b>100.
Выбор растворителей.
Взаимная растворимость фаз.
Растворимость данного вещества и селективность растворителя.
Устойчивость вещества в растворе.
Чистота и устойчивость растворителя.
Достаточное различие плотности обеих фаз (на 0,1 – 0,2).
Склонность к образованию эмульсий.
Для разрушения эмульсий спирт, ацетон, бензол, насыщенный р-р поваренной соли.
Безопасность.
Легкость удаления растворителя из экстракта.
5.1. Сверхкритическая экстракция (SFE).
SFE используется для сложных смесей и рассматривается как альтернатива Сокслету.
Для экстракции применяется углекислый газ. Параметры, которые можно варьировать: плотность (давление) СО2, температура, расход, предобработка образцов, сбор фракций и время экстракции.
Правила для изменения параметров.
При увеличении давления и плотности увеличивается экстрагирующая способность СО2.