С₁₄ Н₂₉ , %

Співвідношення вмісту С₁₄ Н₂₉ до С₁₂ Н₂₅ Співвідношення вмісту С₁₂ Н₂₅ у СЗ до С₁₂ Н₂₅ у МС Співвідношення вмісту С₁₄ Н₂₉ у СЗ до С₁₄ Н₂₉ у МС Стандартний зразок (СЗ) 69,24 30,76 1:2,25 1: 0,9 1:0,57 Модельна суміш (МС) 62,12 17,61 1:3,53

Для оцінки можливого впливу якості компонентів реакції на їх взаємодію нами проведений аналіз фармакопейних вимог до субстанцій кромоглікату натрію, бензалконію хлориду і води для ін'єкцій. Встановлено, що вміст оксалатів у субстанції кромоглікату натрію та іонів кальцію та магнію у воді для ін'єкцій може вплинути на прозорість розчину ЛР і антимікробного консерванту, важких металів у субстанції кромоглікату натрію і води для ін'єкцій – на взаємодію ЛР і антимікробного консерванту (згідно з літературними даними), склад гомологів бензалконію хлориду – на кількісний вміст антимікробного консерванту.

Враховуючи, що субстанція кромоглікату натрію може містити оксалати, а вода для ін'єкцій - іони Са²⁺ і Mg²⁺ , існує ймовірність утворення нерозчинних оксалатів кальцію та магнію. Це може привести до необ’єктивної оцінки показника „Прозорість” при виборі способу запобігання несумісності ЛР і антимікробного консерванту. З метою визначення впливу металів на прозорість 2 % розчину кромоглікату натрію нами розраховані концентрації іонів кальцію, магнію й оксалату, що викликають утворення осаду при вмісті протиіону в максимально допустимій концентрації (табл. 3).

Таблиця 3

Розраховані концентрації іонів кальцію, магнію та оксалату, що викликають випадання осаду оксалатів кальцію та магнію

Іон	Гранично допустима концентрація		Протиіон	Концентрація протиіона, що викликає випадання осаду
	моль/л	ppm		моль/л	ppm
Кальцій	5×10-5	2	Оксалат	4,6×10-5	4,05
Магній	4,94×10-5	1,2	Оксалат	1,721	41,81×103
Оксалат	7,95×10-4	70	Кальцій	2,89 10-6	0,116
Оксалат	7,95×10-4	70	Магній	0,107	2,59×103

Визначено, що на прозорість 2 % розчину кромоглікату натрію можуть вплинути тільки іони кальцію, концентрація яких не повинна перевищувати 0,116 ррm.

Вивчення різних зразків води для ін'єкцій (отримані з різних джерел) (табл. 4 і 5), показало, що при вмісті іонів кальцію в концентрації 0,156 ррm розчини непрозорі (еталон І), що підтверджує розрахункові дані. Концентрація кальцію визначена методом атомно-абсорбційної спектроскопії в ЦЗЛ ЗАО “Біолек” під керівництвом д.ф.н. Краснопольського Ю.М. Одержані результати враховані при розробці способу запобігання несумісності ЛР і антимікробного консерванту.

Таблиця 4

Кількісний вміст іонів кальцію в зразках води для ін'єкцій

Гранично допустима норма (розрахункова), ppm	Зразок 1, ppm	Зразок 2, ppm
2,0	0,156	0,083

Для одерження прозорого розчину кромоглікату натрію і бензалконію хлориду з необхідним вмістом компонентів вивчена можливість введення бензалконію хлориду в надлишкових кількостях, а також введення стабілізаторів.

Таблиця 5

Вплив якості води на фізико-хімічні показники розчинів кромоглікату натрію

Показник	Серія кромоглікату натрію
	00Н450	02Н705	011Н615	03Н17
зразок води 1
прозорість	еталон I	еталон I	еталон I	еталон I
кольоровість	ВY7	ВY7	ВY7	ВY7
рН	5,9	6,2	6,0	6,0
зразок води 2
прозорість	прозорий	прозорий	прозорий	прозорий
кольоровість	ВY7	ВY7	ВY7	ВY7
рН	6,1	6,2	6,0	6,2

Враховуючи, що субстанція бензалконію хлориду складається із суміші гомологів, а найбільшу реакційну здатність стосовно кромоглікату натрію має гомолог С₁₄ , нами було припущено, що при введенні додаткової кількості консерванту реакція пройде, в основному, за рахунок С₁₄ , а вміст бензалконію хлориду збільшиться за рахунок гомолога С₁₂ . Введення додаткових кількостей бензалконію хлориду, як до, так і після фільтрації, не привело до його вихідного вмісту.

З літератури відомо, що одним зі шляхів вирішення проблеми несумісності бензалконію хлориду з лікарськими речовинами є використання різних стабілізаторів. На підставі цих даних нами вивчений вплив деяких речовин на прозорість водного розчину кромоглікату натрію і бензалконію хлориду в залежності від послідовності введення стабілізаторів у розчин. Результати дослідження представлені в табл. 6.

Таблиця 6

Вплив стабілізаторів та послідовності їх введення на прозорість модельної суміші кромоглікату натрію і бензалконію хлорида

№	Стабілізатор	Концентрація стабілізатора, г/л	Прозорість модельної суміші
			до*	між*	після*
1	Трилон Б	0,1	завись	завись	завись
		1,0	завись	завись	завись
2	Натрію цитрат	5,0	завись	завись	завись
		10,0	завись	завись	завись
3	Твін 80	0,5	прозорий	прозорий	прозорий
		1,0	прозорий	прозорий	прозорий
4	Диетаноламін**	1,0	завись	завись	завись
		10,0	завись	завись	завись
5 5	Триетаноламін**	1,0	завись	завись	завись
		10,0	завись	завись	завись
6	Лізину гідрохлорид	5,0	завись	завись	завись
		20,0	завись	завись	завись
7 5	Трометамол**	5,0	завись	завись	завись
		20,0	завись	завись	завись

Примітка. * до – введення стабілізатора у розчин до основних компонентів; між - введення стабілізатора у розчин між основними компонентами; після - введення стабілізатора у розчин після основних компонентів. ** - доведення рН розчину модельної суміші до значення 7,0.

З табл. 6 видно, що позитивні результати отримані тільки при використанні твіну 80, введення якого дозволило одержати прозорий розчин кромоглікату натрію і бензалконію хлориду незалежно від порядку введення стабілізатора.

З метою визначення оптимальної концентрації твіну 80 були вивчені модельні суміші, які містять 2 % кромоглікату натрію, 0,01 % бензалконію хлориду і твін 80 у відповідних концентраціях, за показниками „Прозорість” (табл. 7) і „Кількісний вміст бензалконію хлориду” (рис. 2).

Таблиця 7

Вплив концентрації твіну 80 на прозорість розчину кромоглікату натрію і бензалконію хлориду протягом 24 годин зберігання

Концентрація твіну 80, %	Прозорість
	вихідний	4 год	8 год	24 год
0	інтенсивніше еталона ІV	інтенсивніше еталона ІV	інтенсивніше еталона ІV	інтенсивніше еталона ІV
0,004	між еталонами ІІІ та ІV	між еталонами ІІІ та ІV	між еталонами ІІІ та ІV	між еталонами ІІІ та ІV
0,006	еталон ІІІ	еталон ІІІ	еталон ІІІ	еталон ІІІ
0,008	між еталонами ІІ та ІІІ	між еталонами ІІ та ІІІ	між еталонами ІІ та ІІІ	між еталонами ІІ та ІІІ
0,01	між еталонами І та ІІ	між еталонами І та ІІ	між еталонами ІІ та ІІІ	між еталонами ІІ та ІІІ
0,015	еталон І	еталон І	еталон І	еталон І
0,02	прозорий	прозорий	прозорий	прозорий
0,025	прозорий	прозорий	прозорий	прозорий

У результаті проведених досліджень встановлено, що додавання твіну 80 у концентрації 0,02 % приводить до одержання прозорого розчину кромоглікату натрію і бензалконію хлориду з вмістом антимікробного консерванту 0,01 %.

Подальші дослідження були присвячені вибору ДР, що забезпечують стабільність препарату і відповідність фізіологічним показникам слізної рідини.

З метою посилення антимікробної дії бензалконію хлориду до складу препарату був введений трилон Б. Враховуючи дисоціацію етилендіамінтетраоцтової кислоти в залежності від рН середовища і максимально можливий сумарний вміст металів у компонентах препарату, виходячи з нормованих їх кількостей, який склав 7,701×10^-5 моль/л, була обрана концентрація трилону Б 0,05 %.

Вибір твіну 80 і трилону Б як ДР в очних краплях кромоглікату натрію підтверджений позитивними результатами дослідження стабільності модельної суміші, яка містить 2 % кромоглікату натрію, 0,01 % бензалконію хлориду, 0,05 % трилону Б і 0,02 % твіну 80, протягом року (табл. 8).

Таблиця 8

Показники якості модельної суміші при зберіганні протягом року

Показник	Нормовані показники якості очних крапель	Значення показника модельної суміші
		вихідне	після 1 року зберігання
Зовнішній вигляд до фільтрації	Повинен бути прозорим	прозорий	-
Зовнішній вигляд після фільтрації	Повинен бути прозорим	прозорий	прозорий
Кольоровість	Повинен бути безбарвним або не інтенсивніше еталона GY5	не інтенсивніше еталона GY5	не інтенсивніше еталона GY5
Кількісний вміст кромогликату натрію, г/мл	Від 0,018 до 0,022	0,020	0,020
Кількісний вміст бензалконію хлориду, г/мл	Від 0,00009 до 0,00011	0,00009	0,00010

Відповідність фізіологічним показникам слізної рідини забезпечується створенням необхідних значень рН і осмолярності очних крапель. Для вибору оптимального значення рН препарату нами вивчено поводження кромоглікату натрію у водних розчинах і вплив різних факторів на його стабільність.

Рівноважні процеси у водних розчинах кромоглікату натрію описуються рівняннями 1 і 4:

????²⁺ + 2 ?₂ ? ?????₂ + 2 ??^- (4)

У процесі гідролізу кромоглікату натрію може утворюватися кромогліцинова кислота, яка має низьку розчинність у воді. Концентрації іонів, що беруть участь у цих реакціях, залежать від константи іонізації кромогліцинової кислоти і рН середовища. З метою вибору області рН, оптимальної з погляду стабільності кромоглікату натрію, нами були розраховані молярні частки іонів, що знаходяться в розчині кромоглікату натрію, і вивчений зовнішній вигляд 2 % розчину кромоглікату натрію при різних значеннях рН. Розрахунок проводили за наступними формулами:

a (Н₂ А) = 1 / (1 + 10 ^{рН – рК} ₁ + 10 ^{2 рН – рК} ₁ ^{– рК} ₂ ) ,