Статья: Метилотрофные бактерии - источники изотопно-меченных Н-2 и С-13 аминокислот
Многоступенчатая адаптация бактерий к
2 Н2 О на средах, содержащих 0; 24,5; 49; 74,5; 98
об.% 2 H2 O
B. methylicum , адаптированный M. flagellatum ,
к 98 об.% 2 Н2 О и 2 об.% С2 Н3 О2 Н замедление роста на
среде, содержащей 74,5 об.% 2 Н2 О
Культивирование на средах, Культивирование на среде,
содержащих различные концентрации содержащей обычную воду
2 Н2 О и 1 об.% 13 СН3 ОН
Культуральная жидкость после биомасса биомасса Культуральная жидкость после отделения от клеток отделения от клеток
2 Н-секретируемые аминокислоты 13 С-секретируемые аминокислоты
Гидролиз суммарных белков в
4н. Ва(ОН)2 или 6 н. 2 НСl ( в 2 Н2 О)
2 Н-и 13 С-аминокислоты в
составе белковых гидролизатов
Обработка DnsCl и CH2 N2 Обработка ZСl
Оценка уровней изотопного Обращённо-фазовая Обращённо-фазовая ВЭЖХ
включения методом масс- ВЭЖХ метиловых Z-производных аминокислот
спектрометрии метиловых эфиров дансил-аминокислот
эфиров дансил-аминокислот аминокислот
Оценка уровней изотопного
Схема
Адаптация метилотрофных бактерий к средам, содержащим максимальные концентрации 2 Н2 О и получения 2 Н-и 13 С-аминокислот.
Изучение ростовых характеристик M. flagellatum на средах, содержащих СН3 ОН/С2 Н3 О2 Н/13 СН3 ОН и 2 Н2 О .